中国中药资源丰富,共有12807种动物、植物和药用矿物。但年出口额只有7亿美元,在国际市场的销售额不到国际中药的2%。守护中药金矿,
但是为什么敲开国际市场的大门很难呢?造成这种情况的原因是多方面的,中药残留问题是其中一个重要方面。
近年来,国内外在食品和农作物中农药残留的分析方法研究方面取得了很大进展,特别是在各类农药的多残留分析、同类型农药的多残留分析、样品中新的单一农药的分析和快速分析方面。
这些方法在中药农药残留分析中的应用也在探索中。
对常规检测方法的研究正在逐步深入。
薄层色谱法、液相色谱法、气相色谱法等。是检测和分析中药农药残留的常规技术,相关研究取得了很大进展。
薄层色谱法:这种方法是用固体吸附剂(如硅胶、氧化铝等)进行分布色谱分离分析的方法。)为载体,水为固定相溶剂,流动相一般为有机溶剂。薄层色谱法不需要特殊设备,方法简单、快速、直观,可同时分析多个样品。
但灵敏度较低,近年来很少使用。现在常与其他技术结合,对样品中分离的或多种成分进行定性和定量分析。比如首都师范大学化学系的胡秋菊等。采用薄层荧光法研究中草药中西维因的残留。
以环己烷-丙酮-氯仿(511)为展开剂,回收率为80% ~ 111%。
液相色谱(LC):该方法具有分离速度快、检测效率高、重复性好的特点。主要用于极性强、分子量大的离子型农药的分离和检测,尤其适用于加热时不易气化或分解的农药。然而,当分析具有复杂成分的样品时,
选择性和灵敏度不如气相色谱法。中国药品生物制品检定所田金贵等。采用反相高效液相色谱法测定中药中农药残留量,使用ODS柱,以甲醇-水(7525)为流动相。
结果回收率为92.67% ~ 100.21%。
气相色谱法(GC):是目前应用最广泛的方法,高达70%的农药残留都是通过这种方法检测出来的。该方法操作简单,分析速度快,分离效率高,灵敏度高,适用范围广,可同时分离分析多种组分。
广泛应用于有机氯、有机磷、拟除虫菊酯等分子量相对较小,易汽化,汽化后不分解的农药残留分析。赵等利用该方法测定了当归中PC-NB、PCA、DDE等有机氯农药的残留量。
回收率为82.41% ~ 98.12%。气相色谱-质谱:该方法不仅具有气相色谱的高分离效率,还具有质谱准确鉴定化合物结构的特点,可以同时达到定性和定量检测的目的。
该方法在农药代谢物、降解产物和多残留检测方面具有优势,适用于挥发性和半挥发性有机农药、除草剂等农药的残留分析,主要包括有机氯、有机磷、有机氮和氨基甲酸酯。
例如,Hengel等人用气相色谱-质谱法测定蛇麻花中的百菌清残留,回收率为79% ~ 103%。
新的农药残留分析技术不断涌现。
近年来,一些已广泛应用于食品、农作物和环境中的农药残留分析技术已有一定的科研基础,可逐步应用于中药领域,应受到中药领域的重视。
超临界流体色谱(SFC):以超临界流体为色谱流动相的SFC弥补了GC和HPLC的不足,成为一种强有力的分离检测手段。它可以与大多数GC和HPLC检测器连接,
拓宽了其应用范围,许多需要在GC或HPLC上衍生化的农药可以直接用SFC测定;分子量大、热不稳定的化合物和极性强的化合物可以在较低的温度下分析。然而,由于昂贵的SFC设备,
这限制了它广泛应用。EL-Saeid等人利用超临界流体萃取(SFE)和超临界流体萃取(SFC)技术对罐头食品、水果和蔬菜中的除虫菊酯、氨基甲酸酯类等农药残留进行了分析,得到了准确可靠的结果。
柱切换高效液相色谱(CSHPLC):将固相萃取与现代高效液相色谱相结合,利用多通道切换阀改变进样阀与色谱柱、色谱柱与色谱柱、检测器的连接关系。
从而使两种或两种以上的流动相在特定时间内以不同的流动路径或趋势洗脱不同的柱,以达到多种分离目的。
CSHPLC集样品纯化、浓缩、分离和测定于一体。样品不需要预处理或预处理大大简化,可直接进样分析,克服了样品预处理繁琐费时的缺点,显示出极大的优势。
目前,该技术已广泛应用于环境保护、农药残留监测等领域。Nemth等分别用C18预柱和分离柱测定了环境水和饮用水中的5种除草剂,回收率为94.9% ~ 101.6%。
液相色谱-质谱(LC-MS):这是一种将LC和MS串联成一台整机的检测技术。目前LC和质谱一般通过电喷雾离子源、大气压化学电离源等接口技术连接。
它已成功用于分析对热不稳定、相对分子量大、难以用气相色谱分析的化合物。它具有检测灵敏度高、选择性好、定性定量分析同时进行、结果可靠等优点。此外,LC-MS可以在分析前纯化简单的样品。
它具有几乎通用的多残留分析能力,是一种高效可靠的分析技术,具有很大的应用价值。例如,扬松等人用这种方法分析了水果和蔬菜中的57种农药残留,回收率为70% ~ 100%。
毛细管电泳(CE)和毛细管区带电泳(CZE): CE和CZE):CE特别适用于分离用常规液相色谱难以分离的离子化合物。
毛细管电泳具有操作简单、分析速度快、运行成本低、柱效高等特点。CZE分离效率高,操作简单,灵活性大,可以调节许多分离参数,如缓冲液的组成和pH值,毛细管的类型和所用的电场波形。
测定所需的样品量非常少。
免疫分析是一种基于抗原和抗体特异性识别和结合反应的分析方法,自20世纪90年代以来一直是农药残留分析技术的重点研究、开发和利用对象。免疫分析具有特异性强、灵敏度高、方便快捷、分析量大、安全可靠等优点。
可广泛应用于现场样品和大量样品的快速检测。但由于抗体制备的难度和特异性,IA只适用于单一农药残留的检测分析,开发成本高,时间长。
李等设计了一种适用于现场检测五氯苯酚的快速IA法,并将其用于土壤样品中五氯苯酚含量的检测。最低检测限为1微克/毫升。虽然检出限不理想,但分析速度快,5分钟内即可出结果,回收率为(92.10)%。
传感器技术:传感器法是将传感器技术与农药IA技术相结合而建立起来的,可以说是IA技术的延伸或分支,包括生物传感器和免疫反应传感器。在农药残留检测领域,
农药对靶标酶(如乙酰胆碱酯酶)活性的抑制作用主要用于研究酶传感器,基于农药结合特异性抗体的反应特性研制免疫传感器,用于相应农药残留的快速定性定量检测。
Nune等人利用乙酰胆碱酯酶生物传感器和色谱技术测定农作物中的氨基甲酸酯类农药残留,取得了良好的效果。传感器法具有样品用量少、响应速度快的优点,甚至可以实现在线快速跟踪分析。
但分析结果稳定性差,重现性差,使用寿命短,使用成本高。
(刘海涛张本刚陈建民)